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    Western Blot快速轉膜液(20X)簡介

    更新時間:2022-07-19 點擊量:6454

    Western Blot Rapid Transfer Buffer

    (20X)

    Catalog Number:ED510


     

    01/產品概


    立譜沃生物的Western Blot快速轉膜液(20X),即Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X),是一種20倍濃縮的安全無毒害的用于Western Blot實驗的快速濕轉緩沖液。本產品采用全新的快速轉印配方,15-30 min即可高效、快速地將蛋白轉移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。本產品為20倍濃縮(20X)溶液,使用前需要用適當水和乙醇稀釋至1X。配制過程中,可用無水乙醇替代甲醇,無需使用劇毒的甲醇等試劑安全無毒害。轉膜全程產熱小,無需外置冰浴。



     

     

    02/產品組分


    組分

    ED510

    Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X)

    500 mL

     

     



    03/保存條件


    常溫運輸。室溫干燥處保存,有效期12個月。



     

     

    04/產品特點


    1. 轉印快速、高效——500mA恒流轉膜15-20分鐘或400mA恒流轉膜約20-30分鐘,即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉移至印跡膜上轉膜效果好。

    2. 無需外置冰浴,僅使用內置冰盒即可——轉膜過程產熱非常小,無需外置冰浴,減少蛋白損失。相同的條件下使用傳統的轉膜液更容易導致過度發熱,而在發熱程度相似的情況下傳統轉膜液需要轉膜更長時間。

    3. 使用安全——可用無水乙醇替代甲醇,選擇靈活,可避免使用有毒的甲醇等試劑。



     

     

    05/適用范圍


    Western Blot快速轉膜液(20X)適用于Western Blot濕轉法轉膜。兼容各種常見凝膠,例如Laemmli膠、預制膠、FastPAGE、Bis-Tris膠等。



     

     

    06/使用說明


    一、Western Blot快速轉膜液(1X) 1000 mL的配制方法:

    取Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X) 50mL加入850 mL超純水中,加入100 mL 無水甲醇(或無水乙醇),混勻,4℃保存備用。


    二、參考轉膜條件:

    根據實驗條件及儀器的不同,轉膜條件會有差別。通常條件下,轉膜電流可設置為電泳儀允許的最大電流。具體轉膜條件可根據電泳儀電流限定、凝膠厚度、分離膠濃度、目的蛋白分子量做出適當調整。參考轉膜條件如下:

     

    1. 梯度膠

    濃度4%~15%,厚度0.75 mm,恒流400 mA,30 min以內所有條帶均可完成轉膜。

     

    2. 普通PAGE膠

    轉膜效率與分離膠濃度及厚度有關,對于各濃度1.0 mm 凝膠,采用恒流400 mA,按如下時長即可將150 kDa 以下蛋白轉印*,若蛋白分子量大于150 kDa,需延長轉膜時間5-10 min。


    分離膠濃度

    6%

    7.5%

    10%

    12.5%

    推薦轉膜時間

    20 min

    25 min

    30 min

    35 min

    Ø PAGE膠厚度越厚,轉膜效率越低。對于厚度1.5 mm的凝膠,可將上表推薦的轉膜時間相應延長5-10 min。



     

     

    07/注意事項


    1. PVDF膜使用前需用無水甲醇潤濕30秒以上進行活化。

    2. 轉膜液稀釋為1x后請盡快使用,應避免長時間存放于室溫,短期內保存建議放置于4℃冰箱。

    3. 轉膜時,如果出現報錯而停止,需要根據情況查看是否是電壓或電流過載、轉膜液過多或過少、轉膜槽短路或斷路等異常情況。

    4. 回收的轉膜液可重復使用1-2次,但為取得更好的轉膜效果,不建議多次重復使用,以免影響轉膜效率。

    5. 為了您的健康安全,請規范操作,穿戴實驗服與手套開展實驗。

    6. 本產品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及治療。



     

     

    08/其他相關產品


    產品名稱

    貨號

    規格

    Western Blot CBB Protein Safe Stain Solution (Decolorization Free, 1X)

    ED410-1

    100 mL

    ED410-5

    500 mL

    Western Blot Rapid Blocking Buffer 

    (Protein Free, 1X)

    ED610-1

    100 mL

    ED610-5

    500 mL

    Western Blot Stripping Buffer (1X)

    ED710-1

    100 mL

    ED710-5

    500 mL

    Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer (1X)

    ED810-1

    100 mL

    ED810-5

    500 mL

    Western Blot Ultra Sensitive 

    ECL Chemiluminescent Substrate Kit

    ED910-1

    100 mL

    ED910-5

    500 mL

     

     

     

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